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产品型号:
KB2070A
产品名称:
人纤调蛋白(fibromodulin)ELISA试剂盒
产品报价:
产品特点:
KB2070A
人纤调蛋白(fibromodulin)ELISA试剂盒
Human fibromodulin ELISA Kit
96T/48T
  KB2070A人纤调蛋白(fibromodulin)ELISA试剂盒的详细资料:

人纤调蛋白(fibromodulin)ELISA试剂盒

Human fibromodulin ELISA Kit


包装:96T/48T
检测标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
保存:2-8℃,一年。

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供应商:

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试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
800 pg/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
400 pg/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
200 pg/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
100 pg/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 pg/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
25 pg/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 pg/ml (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
尿液、胸腹水、脑脊液:
用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
@@@细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
样品采集:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
@@@液体类标本:
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。 1ml 的 全血可得到 0.5ml 的血清或血浆。每个标本量收集体积= 100ul × 检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
 

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