基本原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗豚鼠IgG抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的IgG与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗豚鼠IgG抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗豚鼠IgG抗体与结合在包被抗体上的豚鼠IgG结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IgG浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IgG的浓度。 描述: 英文名称 | Guinea pig IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit | 中文名称 | 豚鼠免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫吸附测定试剂盒 | 货号 | E-EL-GP0002 | 种属 | Guinea pig/豚鼠 | 规格 | 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips) | 检测方法 | 双抗体夹心法 | 检测范围 | 1.563~100ng/mL | 灵敏度 | 0.938ng/mL |
试剂盒的组成; 名称 | 规格 | 保存 | Micro ELISA Plate | 8×12 / 8×6* | 4℃ | Reference Standard | 2/1 支* | 4℃ | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20mL/12mL* | 4℃ | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120μL/70μL* | 4℃ | Biotinytated Detection Ab Diluent | 1瓶 10mL/6mL* | 4℃ | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120μL/70μL* | 4℃(避光) | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 10mL/6mL* | 4℃ | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30mL/16mL* | 4℃ | Substrate Reagent | 1瓶 10mL/6mL* | 4℃(避光) | Stop Solution | 1瓶 10mL/6mL* | 4℃ | Plate Sealer | 5/3 张* | | Manual | 1 份 | | Certificate of Analysis | 1 份 | | *: [96T/48T] |
操作步骤: 1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL, 37℃孵育90分钟 2. 加入100μL 生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟 3. 洗涤3次 4. 加入100μL酶结合物工作液, 37℃孵育30分钟 5. 洗涤5次 6. 加入90μL底物溶液, 37℃孵育15分钟左右 7. 加入50μL终止液,立即在450nm波长处测量OD值 8. 结果计算
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